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  本书的内容由四大部分组成。着重介绍了松树体细胞胚胎发生技术的主要操作环节，从体细胞胚胎室的建设、外植体采集，到体细胞胚胎诱导、增殖、成熟、萌发与植株再生等。详细介绍超低温冻存的生物学原理、技术原理及主要研究进展，并提供了针叶树种胚性细胞冻存与解冻的具体操作步骤。

    本书内容重点突出，理论深度适宜，实用性强，可作为科研院所、高校掌握植物体细胞胚胎发生与超低温冻存相关原理的参考书，也可作为科技人员开展相关研究的技术手册。

1　植物体细胞胚胎发生概况与原理............... 1
1.1　合子胚发生过程 .................................2
1.1.1　被子植物合子胚发生 .......................3
1.1.2　裸子植物合子胚发生 .........................6
1.2　体细胞胚胎发生过程........................6
1.2.1　胚性培养物的诱导与增殖.......................11
1.2.2　体细胞胚的成熟与发育 .........................12
1.3　合子胚发生与体细胞胚胎发生的异同................ 14
1.3.1　形态与组织结构的异同点...........................15
1.3.2　生化方面的异同点.....16
1.3.3　合子胚与体细胞胚胎发生的差异机制研究..................18
1.4　体细胞胚胎发生的调控研究 ...... 19
1.4.1　体细胞胚胎发生的动态追踪..........................19
1.4.2　影响细胞分化的信号分子研究 ...................... 20
1.5　体细胞胚胎发生研究历程........... 21
1.5.1　植物体细胞胚胎发生研究史上的里程碑 .................21
1.5.2　松树体细胞胚胎发生研究历程 ....................... 24
2　松树体细胞胚胎发生技术 ........................ 29
2.1　松树体细胞胚胎发生研究的前期准备..................... 30
2.1.1　体细胞胚胎室的建设 ........................... 30
2.1.2　试剂耗材与培养基配制 ................................ 36
2.2　松树体细胞胚胎发生外植体选择....................... 38
2.2.1　材料的来源 ...........38
2.2.2　不同合子胚发育阶段外植体..........................39
2.3　松树体细胞胚胎发生的诱导 ...... 42
2.3.1　诱导培养基配方.......42
2.3.2　胚性愈伤组织的诱导 .................................44
2.3.3　胚性愈伤的鉴别......45
2.4　松树体细胞胚胎维持与增殖 ...... 45
2.4.1　胚性愈伤的固态增殖 .................................45
2.4.2　胚性愈伤的液态增殖 ............................... 46
2.5　松树体细胞胚胎发育与植株再生......................... 47
2.5.1　松树体细胞胚胎的成熟 ...........................47
2.5.2　松树体细胞胚胎萌发与植株再生 ........................52
2.5.3　松树体细胞胚胎遗传稳定性分析 ........................55
3　体细胞胚胎的超低温冻存技术................. 57
3.1　体细胞胚胎超低温保存的原理与研究进展 ................. 58
3.1.1　体细胞胚胎超低温保存的概念 ..........................58
3.1.2　超低温保存的基本原理 ................................ 60
3.1.3　超低温保存机制的研究 .................................65
3.2　针叶树种胚性细胞常用的两种超低温保存技术............... 68
3.2.1　胚性细胞程序降温方法步骤.............................69
3.2.2　胚性细胞玻璃化方法步骤................................71
3.2.3　保存材料的活性检测 ...................................74
4　体细胞胚胎发生技术的应用与前景......... 77
4.1　体细胞胚胎发生技术在遗传改良上的应用 .................. 78
4.1.1　体细胞胚胎无性系应用于遗传测定.......................78
4.1.2　杂种后代的胚拯救....................................79
4.2　体细胞胚胎发生技术在人工培育上的应用 .................. 79
4.2.1　基于体细胞胚胎的无性系林业 .......................79
4.2.2　体细胞胚胎苗木与人工种子的利用........................82
4.3　体细胞胚胎发生介导的遗传转化......................... 83
4.3.1　松树遗传转化的方法 ...........................83
4.3.2　基于体细胞胚胎发生的遗传转化体系..................85
4.4　体细胞胚胎发生与药用蛋白质的生产...................... 86
4.4.1　药用转基因植物细胞的利用............86
4.4.2　针叶树种药用蛋白的生产..................87